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C112-說明書.pdf
大?。?/span>2020-12-23 10:10:37
ClonExpress II One Step Cloning Kit
ClonExpress®II One Step Cloning Kit
非連接酶依賴型單片段快速克隆試劑盒
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簡單、快速、高效，適用于任何載體
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無需考慮插入片段攜帶的酶切位點
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可高效克隆 50 bp-10 kb 的 DNA 片段
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線性化克隆載體和 PCR 產物可不純化直接克隆
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無連接酶，無自連，陽性率 >95%
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提供在線引物設計軟件CE Design
1.克隆效率極高
圖1
重組產物轉化后平板上一般可形成數千個單克隆，而無插入片段的陰性對照反應轉化后只有數個單克隆形成。因此ClonExpress®系統的自連背景會大大降低連接酶依賴的克隆方式。
2.克隆陽性率95%以上
圖2
鑒定酶切結果表明，克隆陽性率可達95%以上。
ClonExpress®技術是一種簡單、快速并且高效的 DNA 無縫克隆技術，可將插入片段定向克隆至任意載體的任意位點。 ClonExpress®II 是新一代重組克隆試劑盒，包含增強的重組酶 Exnase®II。使用任意方式將載體進行線性化；在插入片段正 / 反向 PCR 引物 5’ 端引入線性化載體的末端序列，使得 PCR 產物 5’ 和 3’ 最末端分別帶有和線性化載體兩末端一致的序列 (15 bp-20 bp)。這種兩端帶有載體末端序列的 PCR 產物和線性化載體按一定比例混合后，在Exnase®II 重組酶的催化下，僅需反應 30 min 即可進行轉化，完成定向克隆，陽性率可達 95% 以上。
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組分 |
C112-01 (25 rxn) |
C112-02 (50 rxn) |
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5 × CE II Buffer |
100 μl |
200 μl |
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Exnase®II |
50 μl |
100 μl |
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500 bp control insert (20 ng/μl) |
5 μl |
5 μl |
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pUC19 control vector，linearized (50 ng/μl，Amp+） |
5 μl |
5 μl |
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