Hyperactive pA-MNase for CUT&RUN

Hyperactive pA-MNase for CUT&RUN

操作簡單：利用酶切代替超聲破碎，僅需1天即可實現從細胞到二代測序文庫的轉化

超高活性：DNA片段化活性極高

細胞起始量低：可兼容低至50個細胞

純度高：蛋白純度高、核酸殘留低

應用于CUT&RUN技術

CUT&RUN（cleavage under targets and release using nuclease）是替換傳統的ChIP-Seq用以研究蛋白質-基因組互作的新技術，與后者相比，它具有顯著優勢，如：信噪比高，可重復性好，實驗周期短（1天實現從細胞到文庫構建），細胞投入量低等，因此，該方法適用于表觀遺傳學、腫瘤、干細胞等研究領域。 

CUT&RUN技術的實驗流程簡單，主要包括：

1.收集細胞并將細胞與連有伴刀豆蛋白A的磁珠進行結合；

2. 孵育一抗；

3. 孵育Protein A/G MNase；

4. 激活Protein A/G MNase進行片段化；

5.DNA提??；

6.文庫構建。

活性檢測

如圖所示，針對300 ng質粒DNA，加入不同質量的pA-MNase于37℃進行酶切反應10 min。只需要0.5 ng pA-MNase即可實現300 ng質粒DNA片段化，說明該融合酶活性很高。

Hyperactive pA-MNase for CUT&RUN是將Protein A與經過工程學改造的超高活性MNase進行融合，形成同時具備MNase外切酶活性與Protein A活性的新型融合酶，專門適用于蛋白質-基因組互作研究的CUT&RUN技術。與傳統的蛋白質-基因組互作研究方法ChIP-Seq相比，CUT&RUN具有顯著優勢，該技術實驗周期短，信噪比高，可重復性好，且細胞投入量低，尤其適用于早期胚胎發育、干細胞、腫瘤以及表觀遺傳學等研究領域。

于-30 ~ -15℃保存，-20 ~ 0℃運輸。