RoomTemp Sample Lysis Kit

1. 應用銜接—PCR擴增

以常溫裂解液（Vazyme #P073），血液基因組提取試劑盒（Vazyme #DC111），PK裂解試劑盒（Vazyme #PD101）及競品T同時處理的3種抗凝劑全血樣本為模板，使用PCR試劑（Vazyme# P222）分別擴增300bp/500bp/1kb/2kb的4個片段，進行瓊脂糖凝膠電泳檢測。結果顯示，常溫裂解與試劑盒提取具有同等優異且單一的擴增條帶，優于PK裂解和競品。

圖1. 4種方式處理全血樣本的PCR擴增結果

2. 應用銜接—qPCR探針法定量

以常溫裂解試劑盒（Vazyme #P073）與血液基因組提取試劑盒，PK裂解試劑盒及競品T同時處理的6個抗凝劑全血樣本為模板，使用qPCR試劑（Vazyme #Q811）對3個基因體系進行擴增檢測。結果顯示，△Ct（試劑盒/PK裂解/競品 - 常溫裂解）≥-0.5，常溫裂解具有更優的靈敏度和擴增平臺。

圖2. 4種方式處理全血樣本的?Ct統計結果

圖3. 4種方式處理全血樣本的擴增曲線

3. 應用銜接— SNP分型

以常溫裂解試劑盒（Vazyme #P073）與血液基因組提取試劑盒，PK裂解試劑盒及競品T同時處理的18個抗凝劑全血樣本為模板，使用qPCR試劑（Vazyme #Q811）對2個SNP位點(rs3787728、rs4947963)進行分型效果檢測。結果顯示，常溫裂解與其他3種方式處理的樣本均具有一致的良好分型效果。

圖4. 4種方式處理全血樣本的SNP分型結果

RoomTemp^TM Sample Lysis Kit是一個簡單快速的血液室溫裂解試劑盒。本試劑盒包含Lysis Buffer和Stabilizing Buffer兩個組分，其中Lysis Buffer包含快速破壞細胞膜蛋白及膜結構的特殊組分，可以充分釋放細胞內的基因組DNA，Stabilizing Buffer添加了保護蛋白和穩定因子，可以消除裂解樣本中的抑制因子對下游qPCR和PCR反應的抑制作用，使裂解后的DNA溶液得以長期穩定儲存。適用的血樣類型包括新鮮血液、凍存血液及常規抗凝劑血液(EDTA、枸櫞酸鹽、肝素鈉等)。室溫裂解3 min，即可從全血樣本中釋放基因組DNA。裂解后的DNA溶液可直接作為模板，應用于Taqman^® 探針法的SNP檢測，qPCR探針法定量，PCR擴增等。無需繁雜的提取操作，即可達到與傳統基因組提取方法一致的效果。除血液外，本試劑盒也可兼容裂解FTA血卡、口腔拭子、植物組織等多種樣本。